Ity fanadihadiana ity dia nanombantombana ny maha-fatiantoka, ny sublethality ary ny poizina amin'ny varotracypermethrineformulations ho an'ny tadpoles anuran. Ao amin'ny fitsapana mafy, ny fifantohana amin'ny 100-800 μg / L dia nosedraina nandritra ny 96 ora. Ao amin'ny fitsapana mitaiza, ny fatran'ny cypermethrin voajanahary voajanahary (1, 3, 6, ary 20 μg / L) dia nosedraina ho an'ny fahafatesana, arahin'ny fitiliana micronucleus sy ny tsy fetezana nokleary sela mena mandritra ny 7 andro. Ny LC50 amin'ny famolavolana cypermethrin ara-barotra ho an'ny tadpoles dia 273.41 μg L−1. Tamin'ny fitsapana mitaiza, ny fifantohana ambony indrindra (20 μg L−1) dia niteraka fahafatesana mihoatra ny 50%, satria namono ny antsasaky ny tadpoles notsapaina. Ny fitsapana micronucleus dia nampiseho vokatra manan-danja tamin'ny 6 sy 20 μg L-1 ary ny tsy fetezana nokleary maromaro no hita, izay manondro fa ny famokarana cypermethrin ara-barotra dia manana poizina genotoxic amin'ny P. gracilis. Ny cypermethrin dia atahorana ho an'ity karazana ity, izay manondro fa mety hiteraka olana maro izany ary hisy fiantraikany amin'ny fihetsehan'ity tontolo iainana ity ao anatin'ny fotoana fohy sy maharitra. Noho izany, azo tsoahina fa ny fandrafetana cypermethrin ara-barotra dia misy fiantraikany poizina amin'ny P. gracilis.
Noho ny fanitarana mitohy ny asa fambolena sy ny fampiharana fatratra nyfifehezana bibikelyRaha ny fepetra, ny biby anaty rano dia matetika voan'ny pestiside1,2. Ny fandotoana ny loharanon-drano akaikin'ny toeram-pambolena dia mety hisy fiantraikany amin'ny fivoarana sy ny fahaveloman'ny zavamananaina tsy lasibatra toy ny amphibians.
Lasa manan-danja hatrany ny amphibiana amin'ny fanombanana ny matrice tontolo iainana. Ny Anurans dia heverina ho bioindicators tsara amin'ny loton'ny tontolo iainana noho ny toetra mampiavaka azy toy ny tsingerin'ny fiainana sarotra, ny tahan'ny fitomboan'ny olitra haingana, ny toetry ny trophika, ny hoditra azo tsapain-tanana10,11, ny fiankinan-doha amin'ny rano ho an'ny fiterahana12 sy ny atody tsy voaaro11,13,14. Ny sahona kely rano (Physalaemus gracilis), fantatra amin'ny anarana hoe sahona mitomany, dia hita fa karazana bioindicator amin'ny fandotoana pestisida4,5,6,7,15. Hita any amin'ny rano mijoro, faritra arovana na faritra misy toeram-ponenana miovaova any Arzantina, Orogoay, Paragoay ary Brezila1617 ny karazana ary heverina ho tsy miova araka ny fanasokajiana IUCN noho ny fizarany midadasika sy ny fandeferany amin'ny toeram-ponenana samihafa18.
Ny voka-dratsin'ny sublethal dia notaterina tamin'ny amphibians taorian'ny fiparitahan'ny cypermethrin, anisan'izany ny fiovan'ny fitondran-tena, ny morphologique ary ny biochemika amin'ny tadpoles23,24,25, ny fiovan'ny fiainana an-tany sy ny metamorphose, ny fiovan'ny enzymatic, ny fihenan'ny fahombiazana24,25, ny hyperactivity26, ny fampiatoana ny asan'ny cholinesterase 27, ny fiovan'ny cholinesterase. Na izany aza, voafetra ihany ny fanadihadiana momba ny fiantraikan'ny cypermethrin amin'ny biby amphibiana. Noho izany dia zava-dehibe ny fanombanana ny mety hisian'ny karazana anuran amin'ny cypermethrin.
Ny fandotoana ny tontolo iainana dia misy fiantraikany amin'ny fitomboana ara-dalàna sy ny fivoaran'ny amphibiana, fa ny voka-dratsy lehibe indrindra dia ny fahasimban'ny fototarazo amin'ny ADN vokatry ny fiparitahan'ny pestisida13. Ny famakafakana ny morphologie ny selan'ny rà dia bioindicator manan-danja amin'ny fandotoana sy ny mety ho poizina amin'ny akora iray amin'ny karazana bibidia29. Ny fitsapana micronucleus dia iray amin'ireo fomba fampiasa matetika indrindra hamaritana ny maha-genotoxicity ny simika ao amin'ny tontolo iainana30. Fomba haingana, mandaitra ary tsy lafo izy io izay famantarana tsara ny fandotoana simika amin'ny zavamananaina toy ny amphibian31,32 ary afaka manome vaovao momba ny fiparitahan'ny loton'ny genotoxic33.
Ny tanjon'ity fanadihadiana ity dia ny fanombanana ny mety ho poizina amin'ny famolavolana cypermethrin ara-barotra amin'ny tadpoles anaty rano amin'ny alàlan'ny fitsapana micronucleus sy ny fanombanana ny loza ateraky ny tontolo iainana.
Fahafatesana mitambatra (%) amin'ny tadpoles P. gracilis niharan'ny fifantohana isan-karazany amin'ny cypermethrin ara-barotra nandritra ny vanim-potoana mafy tamin'ny fitsapana.
Ny fahafatesana mitambatra (%) amin'ny tadpoles P. gracilis dia voan'ny cypermethrin ara-barotra isan-karazany nandritra ny fitsapana mitaiza.
Ny fahafatesan'ny olona ambony voamarika dia vokatry ny fiantraikan'ny genotoxic ao amin'ny amphibians voan'ny cypermethrine samihafa (6 sy 20 μg / L), araka ny asehon'ny fisian'ny micronuclei (MN) sy ny tsy fetezana nokleary amin'ny erythrocytes. Ny fiforonan'ny MN dia manondro hadisoana amin'ny mitosis ary mifandray amin'ny fatoran'ny chromosome amin'ny microtubule, ny tsy fahampian'ny proteinina complexes izay tompon'andraikitra amin'ny fisintonana sy ny fitaterana krômôzôma, ny fahadisoana amin'ny fanavahana ny krômôzôma ary ny fahadisoana amin'ny fanamboarana ny fahasimban'ny ADN38,39 ary mety misy ifandraisany amin'ny oxidative stress40,41. Ny tsy fetezana hafa dia hita tamin'ny fifantohana rehetra nodinihina. Ny fampitomboana ny fatran'ny cypermethrin dia nampitombo ny tsy fetezana nokleary ao amin'ny erythrocytes amin'ny 5% sy 20% amin'ny dosie ambany indrindra (1 μg / L) ary avo indrindra (20 μg / L). Ohatra, ny fiovan'ny ADN amin'ny karazana iray dia mety hisy fiantraikany lehibe ho an'ny fahaveloman'ny fotoana fohy sy maharitra, ka miteraka fihenan'ny isan'ny mponina, fiovan'ny toetran'ny taovam-pananahana, fifindra-monina, fahaverezan'ny fahasamihafan'ny fototarazo, ary fiovan'ny tahan'ny fifindra-monina. Ireo anton-javatra rehetra ireo dia mety hisy fiantraikany amin'ny fahaveloman'ny karazam-biby sy fikojakojana42,43. Ny fiforonan'ny tsy fahatomombanan'ny erythroid dia mety manondro sakana amin'ny cytokinesis, ka miteraka fizarazarana sela tsy ara-dalàna (érythrocytes binucleated)44,45; Ny nuclei multilobed dia tonon-taolana amin'ny fonon'ny nokleary misy lobe maromaro46, raha toa ka misy ifandraisany amin'ny fampitomboana ny ADN ny tsy fetezana erythroid hafa, toy ny voa nokleary / blebs47. Ny fisian'ny erythrocytes anucleated dia mety manondro ny tsy fahampian'ny fitaterana oksizenina, indrindra amin'ny rano maloto48,49. Ny apoptose dia manondro ny fahafatesan'ny sela50.
Ny fandinihana hafa koa dia naneho ny fiantraikan'ny cypermethrin amin'ny genotoxic. Kabaña et al.51 dia naneho ny fisian'ny micronuclei sy ny fiovana nokleary toy ny sela binucleated sy ny sela apoptotika ao amin'ny sela Odontophrynus americanus taorian'ny fiparitahan'ny cypermethrin avo lenta (5000 sy 10,000 μg L−1) nandritra ny 96 h. Ny apoptose vokatry ny cypermethrin dia hita ihany koa tao amin'ny P. biligonigerus52 sy Rhinella arenarum53. Ireo vokatra ireo dia manondro fa ny cypermethrin dia manana fiantraikany genotoxic amin'ny zavamananaina isan-karazany ary ny MN sy ny ENA dia mety ho famantarana ny fiantraikan'ny sublethal amin'ny amphibians ary mety azo ampiharina amin'ny karazam-biby teratany sy ny biby dia voan'ny poizina12.
Ny famolavolana ara-barotra cypermethrin dia miteraka loza ara-tontolo iainana (na acute na mitaiza), miaraka amin'ny HQ mihoatra ny haavon'ny US Environmental Protection Agency (EPA) level54 izay mety hisy fiantraikany ratsy amin'ny karazana raha misy eo amin'ny tontolo iainana. Ao amin'ny fanombanana ny loza mitatao, ny NOEC ho an'ny fahafatesana dia 3 μg L−1, izay manamafy fa ny fifantohana hita ao anaty rano dia mety hampidi-doza ho an'ny karazana55. Ny NOEC mahafaty ho an'ny olitra R. arenarum voan'ny fifangaroan'ny endosulfan sy cypermethrin dia 500 μg L−1 taorian'ny 168 h; Nihena ho 0,0005 μg L−1 ity sanda ity rehefa afaka 336 ora. Nasehon'ireo mpanoratra fa arakaraka ny ela ny fipoiran'ny zava-maniry no mampihena ny fifantohana izay manimba ny karazana. Zava-dehibe ihany koa ny manasongadina fa ny soatoavin'ny NOEC dia ambony noho ny an'ny P. gracilis amin'ny fotoana fiposahan'ny masoandro, izay manondro fa ny valin'ny karazana cypermethrin dia karazana manokana. Ankoatra izany, amin'ny lafiny mety maty, ny sandan'ny CHQ an'ny P. gracilis taorian'ny nipoiran'ny cypermethrin dia nahatratra 64.67, izay ambony noho ny sanda fanondro napetraky ny US Environmental Protection Agency54, ary ny sandan'ny CHQ an'ny R. arenarum larvae dia ambony noho io sanda io (CHQ> 388.00 taorian'ny 336 h), amin'ny fanehoana ny risika be dia be. karazana. Raha jerena fa mitaky 30 andro eo ho eo ny P. gracilis mba hamitana ny metamorphose56, dia azo tsoahina fa ny fifantohana amin'ny cypermethrine nodinihina dia mety hanampy amin'ny fihenan'ny mponina amin'ny alàlan'ny fisorohana ny olona voan'ny aretina tsy hiditra amin'ny dingan'ny olon-dehibe na ny fananahana amin'ny fahazazana.
Ao amin'ny fanombanana ny loza mety hitranga amin'ny micronuclei sy ny tsy fetezana nokleary erythrocyte hafa, ny sandan'ny CHQ dia avy amin'ny 14.92 ka hatramin'ny 97.00, izay manondro fa ny cypermethrine dia manana risika genotoxic amin'ny P. gracilis na dia any amin'ny toeram-ponenany voajanahary aza. Raha jerena ny fahafatesan'ny olona dia 4.24 μg L−1 ny fifantohana ambony indrindra amin'ny fitambarana xenobiotic azo leferina amin'ny P. gracilis. Na izany aza, ny fifantohana ambany amin'ny 1 μg / L dia nampiseho fiantraikany genotoxic. Izany zava-misy izany dia mety hitarika amin'ny fitomboan'ny isan'ny olona tsy ara-dalàna57 ary hisy fiantraikany amin'ny fivoarana sy ny fampitomboana ny karazana any amin'ny toeram-ponenany, ka miteraka fihenan'ny isan'ny amphibiana.
Ny fandrafetana ara-barotra ny cypermethrin famonoana bibikely dia nahitana poizina mahery vaika sy mitaiza ho an'ny P. gracilis. Ny taham-pahafatesana avo kokoa dia voamarika, azo inoana fa noho ny voka-dratsiny, araka ny asehon'ny fisian'ny micronuclei sy ny erythrocyte nuclear abnormalities, indrindra ny nucleus serrated, ny lobed nuclei, ary ny nuclei vesicular. Fanampin'izany, ny karazam-biby nodinihina dia nampiseho fitomboan'ny risika ara-tontolo iainana, na acute na mitaiza. Ireo angon-drakitra ireo, miaraka amin'ny fanadihadiana teo aloha nataon'ny vondrona mpikaroka, dia naneho fa na dia ny famolavolana ara-barotra cypermethrin samihafa aza dia mbola nahatonga ny fihenan'ny acetylcholinesterase (AChE) sy ny butyrylcholinesterase (BChE) ary ny stress oxidative58, ary niteraka fiovana amin'ny hetsika milomano sy ny malformations am-bava59 amin'ny P. gracilis, izay manondro fa ny karazany ara-barotra sy ny subtoxicity ara-barotra dia manana cypertoxic avo lenta. Hartmann et al. 60 dia nahita fa ny famokarana cypermethrin ara-barotra no poizina indrindra amin'ny P. gracilis sy ny karazana hafa mitovy karazana (P. cuvieri) raha oharina amin'ny pestisida sivy hafa. Midika izany fa ny fatran'ny cypermethrin nankatoavina ara-dalàna ho fiarovana ny tontolo iainana dia mety hiteraka fahafatesan'olona sy fihenan'ny mponina maharitra.
Ilaina ny fandinihana fanampiny mba hanombanana ny poizina amin'ny pesticides amin'ny amphibians, satria ny fifantohana hita ao amin'ny tontolo iainana dia mety hiteraka fahafatesana ary mety hampidi-doza ny P. gracilis. Tokony hamporisihina ny fikarohana momba ny karazana amphibiana, satria zara raha misy ny angona momba ireo zavamananaina ireo, indrindra fa ny karazana Breziliana.
Ny fitsapana poizina mitaiza dia naharitra 168 h (7 andro) teo ambanin'ny fepetra static ary ny fifantohana sublethal dia: 1, 3, 6 ary 20 μg ai L−1. Ao anatin'ireo andrana roa ireo, tadpoles 10 isaky ny vondrona fitsaboana no nodinihina niaraka tamin'ny replika enina, ho an'ny totalin'ny tadpoles 60 isaky ny fifantohana. Nandritra izany fotoana izany, ny fitsaboana rano fotsiny dia natao ho fanaraha-maso ratsy. Ny fametrahana andrana tsirairay dia misy lovia fitaratra sterile manana tanjaka 500 ml ary tadpole 1 isaky ny vahaolana 50 ml. Norakofana sarimihetsika polyethylene ny tavoara mba hisorohana ny etona ary tsy mitsaha-mitombo.
Ny rano dia nodinihina tamin'ny fomba simika mba hamaritana ny haavon'ny pestisida amin'ny 0, 96, ary 168 ora. Araka ny voalazan'i Sabin et al. 68 sy Martins et al. 69, ny famakafakana dia natao tao amin'ny Laboratory Analysis Pesticide (LARP) ao amin'ny Oniversite Federaly Santa Maria amin'ny fampiasana chromatography entona miaraka amin'ny spectrometry faobe quadrupole triple (Varian model 1200, Palo Alto, California, Etazonia). Ny famaritana ny fatran'ny pesticides ao anaty rano dia aseho ho fitaovana fanampiny (Table SM1).
Ho an'ny fitsirihana micronucleus (MNT) sy ny fitsapam-pahamalinana nokleary sela mena (RNA), tadpoles 15 isaky ny vondrona fitsaboana no nodinihina. Ny tadpoles dia notsaboina tamin'ny 5% lidocaine (50 mg g-170) ary ny santionan'ny ra dia nangonina tamin'ny alàlan'ny puncture cardiac tamin'ny fampiasana syringe heparinized fanary. Ny fanosorana ra dia nomanina tamin'ny mikraoskaopy sterile, maina ny rivotra, napetraka tamin'ny methanol 100% (4 ° C) nandritra ny 2 minitra, ary avy eo nolokoina tamin'ny vahaolana Giemsa 10% nandritra ny 15 minitra tao anaty maizina. Amin'ny fiafaran'ny dingana, dia nosasana tamin'ny rano nodiovina ny slides mba hanesorana ny tasy be loatra ary ho maina amin'ny mari-pana.
Farafahakeliny RBCs 1000 avy amin'ny tadpole tsirairay dia nodinihina tamin'ny fampiasana mikraoskaopy 100 × misy tanjona 71 mba hamaritana ny fisian'ny MN sy ENA. Ny totalin'ny RBC 75,796 avy amin'ny tadpoles dia nodinihina raha jerena ny fifantohana sy ny fanaraha-maso cypermethrin. Ny genotoxicity dia nodinihina araka ny fomba nataon'i Carrasco et al. ary Fenech et al.38,72 amin'ny famaritana ny fatran'ireto ratra nokleary manaraka ireto: (1) sela anukleate: sela tsy misy nokleary; 2) sela apoptotika: fizarazarana nokleary, fahafatesan'ny sela voaprograma; (3) sela binucleate: sela misy nokleary roa; (4) tsimokaretina nokleary na sela bleb: sela misy nokleary misy tohodrano kely amin'ny membrane nokleary, blebs mitovy habe amin'ny micronuclei; 5) sela karyolyzé: sela tsy misy afa-tsy ny endriky ny nucleus tsy misy fitaovana anatiny; 6) cellules notched: sela misy nokleary misy triatra mazava be na tady amin'ny endriny, antsoina koa hoe nucleus miendrika voa; 7) sela misy lobôlaly: sela misy fivontosana nokleary lehibe kokoa noho ireo vesikely voalaza etsy ambony; ary (8) microcells: sela misy nokleary mivohitra sy cytoplasma mihena. Nampitahaina tamin'ny vokatry ny fanaraha-maso ratsy ny fiovana.
Ny valin'ny fitsapana poizina mahery vaika (LC50) dia nodinihina tamin'ny fampiasana rindrambaiko GBasic sy ny TSK-Trimmed Spearman-Karber method74. Ny angon-drakitra fitsapana mitaiza dia nosedraina mialoha ho an'ny normality diso (Shapiro-Wilks) sy ny homogeneity of variance (Bartlett). Ny valiny dia nodinihina tamin'ny alàlan'ny fandalinana ny variana tokana (ANOVA). Ny fitsapana an'i Tukey dia nampiasaina mba hampitahana ny angona eo amin'izy ireo, ary ny fitsapana an'i Dunnett dia nampiasaina mba hampitahana ny angona eo amin'ny vondrona fitsaboana sy ny vondrona mpanara-maso ratsy.
Ny angon-drakitra LOEC sy NOEC dia nodinihina tamin'ny alàlan'ny fitsapana Dunnett. Ny fitsapana statistika dia natao tamin'ny fampiasana rindrambaiko Statistica 8.0 (StatSoft) miaraka amin'ny haavon'ny lanjany 95% (p <0.05).
Fotoana fandefasana: Mar-13-2025