Ity fandalinana ity dia nanombana ny mety hahafaty, ny tsy fahafahany mahafaty, ary ny poizina ateraky ny akora ara-barotrasipermetrinafangaro ho an'ny tsiboboka anuran. Tao amin'ny fitsapana tampoka, dia notsapaina nandritra ny 96 ora ny fifantohana 100–800 μg/L. Tao amin'ny fitsapana mitaiza, dia notsapaina ny fahafatesana tamin'ny fifantohana cypermethrin voajanahary (1, 3, 6, ary 20 μg/L), narahin'ny fitsapana micronucleus sy ny tsy fetezan'ny nokleary sela mena nandritra ny 7 andro. Ny LC50 amin'ny fangaro cypermethrin ara-barotra ho an'ny tsiboboka dia 273.41 μg L−1. Tao amin'ny fitsapana mitaiza, ny fifantohana ambony indrindra (20 μg L−1) dia nahatonga fahafatesana mihoatra ny 50%, satria nahafaty ny antsasaky ny tsiboboka notsapaina. Ny fitsapana micronucleus dia naneho vokatra manan-danja tamin'ny 6 sy 20 μg L−1 ary nahitana tsy fetezan'ny nokleary maromaro, izay manondro fa ny fangaro cypermethrin ara-barotra dia manana hery manimba ny P. gracilis. Ny cypermethrin dia mampidi-doza ho an'ity karazana ity, izay manondro fa mety hiteraka olana maro izy io ary hisy fiantraikany amin'ny dinamikan'ity tontolo iainana ity amin'ny fotoana fohy sy maharitra. Noho izany, azo tsoahina fa ny fangaro cypermethrin ara-barotra dia misy fiantraikany poizina amin'ny P. gracilis.
Noho ny fitohizan'ny asa fambolena sy ny fampiharana betsaka nyfanaraha-maso ny bibikelyAmin'ny fepetra sasany, matetika ireo biby anaty rano no tratran'ny fanafody famonoana bibikely1,2. Ny fandotoana ny loharanon-drano akaikin'ny saha fambolena dia mety hisy fiantraikany amin'ny fivoarana sy ny fahaveloman'ireo zavamananaina tsy lasibatra toy ny amphibians.
Miha-zava-dehibe hatrany ny sahona anaty rano amin'ny fanombanana ny tontolo iainana. Ny Anuran dia heverina ho mari-pamantarana tsara amin'ny fahalotoan'ny tontolo iainana noho ny toetrany miavaka toy ny tsingerim-piainana sarotra, ny tahan'ny fitomboan'ny larva haingana, ny toetry ny trophic, ny hoditra mora miditra10,11, ny fiankinan-doha amin'ny rano ho an'ny fiterahana12 ary ny atody tsy voaaro11,13,14. Ny sahona kely tsy misy rano (Physalaemus gracilis), izay fantatra amin'ny anarana hoe sahona mitomany, dia naseho ho karazana mari-pamantarana ny fahalotoan'ny pestisida4,5,6,7,15. Hita any amin'ny rano miandrona, faritra arovana na faritra misy toeram-ponenana miovaova any Arzantina, Orogoay, Paragoay ary Brezila1617 ity karazana ity ary heverina ho marin-toerana araka ny fanasokajiana IUCN noho ny fizarazarany mivelatra sy ny fandeferany amin'ny toeram-ponenana samihafa18.
Nisy tatitra momba ny fiantraikany tsy mahafaty amin'ny biby amphibiana taorian'ny fihanaky ny cypermethrin, anisan'izany ny fiovan'ny fitondran-tena, ny endrika ary ny biochemika amin'ny tsiboboka23,24,25, ny fiovan'ny fahafatesana sy ny fotoana fiovan'ny endrika, ny fiovan'ny anzima, ny fihenan'ny fahombiazan'ny fiterahana24,25, ny fihoaram-pefy26, ny fanakanana ny asan'ny cholinesterase27 ary ny fiovan'ny fahaiza-milandrano7,28. Na izany aza, voafetra ny fanadihadiana momba ny fiantraikan'ny cypermethrin amin'ny biby amphibiana. Noho izany, zava-dehibe ny manombana ny mety ho fiantraikan'ny cypermethrin amin'ny karazana anuran.
Misy fiantraikany amin'ny fitomboana sy ny fivoaran'ny biby amphibiana ara-dalàna ny fahalotoan'ny tontolo iainana, saingy ny voka-dratsy lehibe indrindra dia ny fahasimban'ny fototarazo amin'ny ADN vokatry ny fihanaky ny pestisida13. Ny famakafakana ny endriky ny sela ao amin'ny ra dia mari-pamantarana bio manan-danja amin'ny fahalotoana sy ny mety ho poizina ateraky ny akora iray amin'ny karazam-biby dia29. Ny fitsapana micronucleus dia iray amin'ireo fomba ampiasaina matetika indrindra hamaritana ny poizina ateraky ny zavatra simika ao amin'ny tontolo iainana30. Fomba haingana, mahomby ary tsy lafo vidy izay mari-pamantarana tsara ny fahalotoan'ny zavatra simika amin'ny zavamananaina toy ny amphibiana31,32 ary afaka manome fampahalalana momba ny fihanaky ny loto misy poizina33.
Ny tanjon'ity fandalinana ity dia ny hanombana ny mety ho poizina ateraky ny cypermethrin ara-barotra amin'ny tsiboboka kely an-drano amin'ny alàlan'ny fitsapana micronucleus sy ny fanombanana ny risika ara-tontolo iainana.
Fahafatesana mitambatry ny (%) amin'ny tsiboboka P. gracilis izay niharan'ny fifantohana samihafa amin'ny cypermethrin ara-barotra nandritra ny vanim-potoanan'ny fitsapana.
Fahafatesana mitambatry ny (%) amin'ny tsiboboka P. gracilis izay niharan'ny cypermethrin ara-barotra samihafa nandritra ny fitiliana maharitra.
Ny fahafatesana avo lenta hita dia vokatry ny fiantraikan'ny genotoxic amin'ny amphibians izay niharan'ny fifantohana cypermethrin samihafa (6 sy 20 μg/L), araka ny asehon'ny fisian'ny micronuclei (MN) sy ny tsy fetezan'ny nokleary ao amin'ny erythrocytes. Ny fiforonan'ny MN dia manondro lesoka amin'ny mitosis ary mifandray amin'ny tsy fahampian'ny fifamatoran'ny chromosomes amin'ny microtubules, lesoka amin'ny complexes proteinina tompon'andraikitra amin'ny fandraisana sy fitaterana ny chromosome, lesoka amin'ny fanavahana ny chromosome ary lesoka amin'ny fanamboarana ny fahasimban'ny ADN38,39 ary mety mifandray amin'ny adin-tsaina oxidative vokatry ny pestisida40,41. Hita ny tsy fetezan'ny hafa tamin'ny fifantohana rehetra nodinihina. Ny fitomboan'ny fifantohana cypermethrin dia nampitombo ny tsy fetezan'ny nokleary ao amin'ny erythrocytes tamin'ny 5% sy 20% tamin'ny fatra ambany indrindra (1 μg/L) sy ambony indrindra (20 μg/L). Ohatra, ny fiovan'ny ADN amin'ny karazana iray dia mety hisy fiantraikany lehibe amin'ny fahavelomana fohy sy maharitra, ka miteraka fihenan'ny mponina, fiovan'ny fahaiza-manaon'ny fananahana, fiompiana anatiny, fahaverezan'ny fahasamihafan'ny fototarazo, ary fiovan'ny tahan'ny fifindra-monina. Ireo anton-javatra rehetra ireo dia mety hisy fiantraikany amin'ny fahaveloman'ny karazana sy ny fikojakojana azy42,43. Ny fiforonan'ny tsy fetezan'ny erythroïde dia mety manondro sakana amin'ny cytokinesis, ka miteraka fizarazarana sela tsy ara-dalàna (erythrocytes misy nokleary)44,45; ny nokleary misy lobes maro dia mipoitra avy amin'ny fonon'ny nokleary misy lobes maro46, raha toa kosa ny tsy fetezan'ny erythroïde hafa dia mety mifandray amin'ny fanamafisana ny ADN, toy ny voa/blebs nokleary47. Ny fisian'ny erythrocytes misy nokleary dia mety manondro ny tsy fahatomombanan'ny fitaterana oksizenina, indrindra amin'ny rano voaloto48,49. Ny apoptosis dia manondro ny fahafatesan'ny sela50.
Nasehon'ny fanadihadiana hafa ihany koa ny fiantraikan'ny cypermethrin amin'ny genotoxicity. Kabaña et al.51 dia naneho ny fisian'ny fiovana micronuclei sy nokleary toy ny sela binucley sy ny sela apoptotic ao amin'ny sela Odontophrynus americanus taorian'ny fihanaky ny cypermethrin avo lenta (5000 sy 10,000 μg L−1) nandritra ny 96 ora. Hita ihany koa ny apoptosis vokatry ny cypermethrin tao amin'ny P. biligonigerus52 sy Rhinella arenarum53. Ireo valiny ireo dia manondro fa ny cypermethrin dia manana fiantraikany genotoxic amin'ny zavamananaina anaty rano isan-karazany ary ny fanadihadiana MN sy ENA dia mety ho famantarana ny fiantraikany submahafaty amin'ny amphibians ary mety azo ampiharina amin'ny karazana teratany sy ny mponina dia tratran'ny poizina12.
Ny cypermethrin ara-barotra dia miteraka loza mitatao ho an'ny tontolo iainana (na tampoka na maharitra), miaraka amin'ny foiben'ny cypermethrin mihoatra ny haavon'ny US Environmental Protection Agency (EPA)54 izay mety hisy fiantraikany ratsy amin'ny karazana raha misy ao amin'ny tontolo iainana. Tao amin'ny fanombanana ny risika maharitra, ny NOEC ho an'ny fahafatesana dia 3 μg L−1, izay manamafy fa ny fifantohana hita ao anaty rano dia mety hampidi-doza ho an'ny karazana55. Ny NOEC mahafaty ho an'ny olitra R. arenarum izay niharan'ny fangaro endosulfan sy cypermethrin dia 500 μg L−1 taorian'ny 168 ora; nihena ho 0.0005 μg L−1 io sanda io taorian'ny 336 ora. Asehon'ireo mpanoratra fa arakaraka ny faharetan'ny fiparitahana no mihena ny fifantohana izay manimba ny karazana. Zava-dehibe ihany koa ny manasongadina fa ny sandan'ny NOEC dia ambony noho ny an'ny P. gracilis tamin'ny fotoana niparitahana mitovy, izay manondro fa ny fihetsiky ny karazana amin'ny cypermethrin dia manokana ho an'ny karazana tsirairay. Ankoatra izany, raha ny amin'ny fahafatesana, ny sandan'ny CHQ an'ny P. gracilis taorian'ny fihanaky ny cypermethrin dia nahatratra 64.67, izay ambony noho ny sanda fanondroana napetraky ny US Environmental Protection Agency54, ary ny sandan'ny CHQ an'ny olitra R. arenarum dia ambony noho io sanda io ihany koa (CHQ > 388.00 aorian'ny 336 ora), izay manondro fa ny fanafody famonoana bibikely nodinihina dia mampidi-doza ho an'ny karazana sahona maromaro. Raha jerena fa mila 30 andro eo ho eo ny P. gracilis vao mahavita ny fiovany endrika56, dia azo tsoahina fa ny fifantohana cypermethrin nodinihina dia mety handray anjara amin'ny fihenan'ny isan'ny biby amin'ny alàlan'ny fisorohana ny olona voan'ny aretina tsy hiditra amin'ny dingana lehibe na fananahana amin'ny fahazazany.
Tao anatin'ny fanombanana ny risika voakajy momba ny micronuclei sy ny tsy fetezan'ny nokleary erythrocyte hafa, ny sandan'ny CHQ dia teo anelanelan'ny 14.92 sy 97.00, izay manondro fa ny cypermethrin dia mety hiteraka poizina amin'ny P. gracilis na dia ao amin'ny toeram-ponenany voajanahary aza. Raha jerena ny fahafatesana, ny fifantohana ambony indrindra amin'ny akora xenobiotika azo leferina amin'ny P. gracilis dia 4.24 μg L−1. Na izany aza, ny fifantohana ambany hatramin'ny 1 μg/L dia naneho fiantraikany amin'ny poizina ihany koa. Mety hitarika amin'ny fitomboan'ny isan'ny olona tsy ara-dalàna57 izany ary hisy fiantraikany amin'ny fivoarana sy ny fananahan'ny karazana ao amin'ny toeram-ponenany, ka hitarika amin'ny fihenan'ny isan'ny sahona.
Ny fangaro ara-barotra amin'ny cypermethrin famonoana bibikely dia naneho poizina mahery vaika amin'ny P. gracilis. Niakatra ny tahan'ny fahafatesana, azo inoana fa noho ny voka-dratsiny, araka ny asehon'ny fisian'ny tsy fetezan'ny nokleary micronuclei sy erythrocyte, indrindra fa ny nokleary serrated, ny nokleary lobed, ary ny nokleary vesicular. Ho fanampin'izany, ny karazana nodinihina dia naneho fitomboan'ny risika ara-tontolo iainana, na mahery vaika na maharitra. Ireo angon-drakitra ireo, miaraka amin'ny fanadihadiana teo aloha nataon'ny vondrona mpikaroka anay, dia naneho fa na dia ny fangaro ara-barotra samihafa amin'ny cypermethrin aza dia mbola miteraka fihenan'ny asan'ny acetylcholinesterase (AChE) sy butyrylcholinesterase (BChE) ary ny adin-tsaina oxidative58, ary niafara tamin'ny fiovan'ny asan'ny filomanosana sy ny tsy fahatomombanan'ny vava59 ao amin'ny P. gracilis, izay manondro fa ny fangaro ara-barotra amin'ny cypermethrin dia manana poizina mahafaty sy tsy mahafaty ho an'ity karazana ity. Hartmann et al. 60 dia nahita fa ny fangaro ara-barotra amin'ny cypermethrin no poizina indrindra amin'ny P. gracilis sy karazana iray hafa amin'io karazana io (P. cuvieri) raha oharina amin'ny fanafody famonoana bibikely sivy hafa. Izany dia midika fa ny fifantohana cypermethrin eken'ny lalàna ho fiarovana ny tontolo iainana dia mety hiteraka fahafatesana avo lenta sy fihenan'ny isan'ny bibikely mandritra ny fotoana maharitra.
Ilaina ny fanadihadiana fanampiny mba hanombanana ny poizina ateraky ny fanafody famonoana bibikely amin'ny sahona, satria ny fifantohana hita eny amin'ny tontolo iainana dia mety hiteraka fahafatesana avo lenta ary mety hampidi-doza ho an'ny P. gracilis. Tokony amporisihina ny fikarohana momba ny karazana sahona, satria vitsy ny angon-drakitra momba ireo zavamananaina ireo, indrindra fa ny karazana breziliana.
Naharitra 168 ora (7 andro) ny fitsapana poizina mitaiza teo ambanin'ny toe-javatra tsy mihetsika ary ny fifantohana ambanin'ny fahafatesana dia: 1, 3, 6 ary 20 μg ai L−1. Tamin'ireo andrana roa ireo, tsiboboka 10 isaky ny vondrona fitsaboana no nodinihina tamin'ny famerenana enina, ka nahatratra 60 isaky ny fifantohana ny tsiboboka. Mandritra izany fotoana izany, ny fitsaboana amin'ny rano ihany no natao ho fanaraha-maso ratsy. Ny fanandramana tsirairay dia nahitana lovia fitaratra sterile misy fahafaha-mamokatra 500 ml ary hakitroky ny tsiboboka 1 isaky ny vahaolana 50 ml. Norakofana sarimihetsika polyethylene ny tavoara mba hisorohana ny etona ary nohafanaina tsy tapaka.
Nohadihadiana tamin'ny alalan'ny simika ny rano mba hamaritana ny fifantohan'ny fanafody famonoana bibikely amin'ny ora 0, 96, ary 168. Araka ny voalazan'i Sabin et al. 68 sy Martins et al. 69, dia natao tao amin'ny Laboratoara Famakafakana ny fanafody famonoana bibikely (LARP) ao amin'ny Oniversite Federaly ao Santa Maria ny fanadihadiana tamin'ny fampiasana chromatography gazy mifamatotra amin'ny spectrometry mass triple quadrupole (Varian model 1200, Palo Alto, Kalifornia, Etazonia). Aseho ho fitaovana fanampiny ny famaritana ny habetsahan'ny fanafody famonoana bibikely ao anaty rano (Tabilao SM1).
Ho an'ny fitsapana mikrônokleary (MNT) sy ny fitsapana ny tsy fetezan'ny sela mena (RNA), dia nodinihina ny tsiboboka 15 avy amin'ny vondrona fitsaboana tsirairay. Nomena fanatoranana tamin'ny lidocaine 5% (50 mg g-170) ny tsiboboka ary nalaina tamin'ny alalan'ny fanindronana fo ny santionan-dra tamin'ny alalan'ny syringe heparine azo ariana. Nomanina tamin'ny alalan'ny mikroskopia sterile ny fandoroana ra, nohamainina tamin'ny rivotra, nohamafisina tamin'ny methanol 100% (4 °C) nandritra ny 2 minitra, ary avy eo nolokoina tamin'ny vahaolana Giemsa 10% nandritra ny 15 minitra tao anaty haizina. Rehefa vita ny dingana, dia nosasana tamin'ny rano voadio ny tsiboboka mba hanesorana ny tasy be loatra ary nohamainina tamin'ny mari-pana ao an-trano.
Farafahakeliny RBC 1000 avy amin'ny tsiboboka tsirairay no nodinihina tamin'ny fampiasana mikroskopia 100× miaraka amin'ny tanjona 71 mba hamaritana ny fisian'ny MN sy ENA. RBC miisa 75.796 avy amin'ny tsiboboka no nodinihina tamin'ny fandinihana ny fifantohana cypermethrin sy ny fanaraha-maso. Nodinihina ny poizina amin'ny alalan'ny genotoxicity araka ny fomba fiasan'i Carrasco et al. sy Fenech et al.38,72 amin'ny famaritana ny fatran'ireto lesoka nokleary manaraka ireto: (1) sela anucleate: sela tsy misy nokleary; (2) sela apoptotic: fizarazarana nokleary, fahafatesan'ny sela voarindra; (3) sela binucleate: sela misy nokleary roa; (4) tsimoka nokleary na sela bleb: sela misy nokleary misy fivoahana kely amin'ny fonon'ny nokleary, blebs mitovy habe amin'ny micronuclei; (5) sela karyolyzed: sela tsy misy afa-tsy ny endriky ny nokleary tsy misy fitaovana anatiny; (6) sela misy nokleary: sela misy nokleary misy triatra na nokleary miharihary amin'ny endriny, antsoina koa hoe nokleary miendrika voa; (7) sela misy lobula: sela misy nify mipoitra lehibe kokoa noho ireo vesicles voalaza etsy ambony; ary (8) sela bitika: sela misy nify mivaingana sy cytoplasma mihena. Noharina tamin'ny valin'ny fanaraha-maso ratsy ireo fiovana ireo.
Nohadihadiana tamin'ny alalan'ny rindrambaiko GBasic sy ny fomba TSK-Trimmed Spearman-Karber ny valin'ny fitsapana poizina tampoka (LC50). Notsapaina mialoha ny fahazarana diso (Shapiro-Wilks) sy ny fitoviana amin'ny variance (Bartlett) ny angon-drakitra fitsapana mitaiza. Nohadihadiana tamin'ny alalan'ny fanadihadiana ny variance amin'ny fomba tokana (ANOVA) ny valiny. Nampiasaina hampitahana ny angon-drakitra eo amin'izy ireo ny fitsapana Tukey, ary nampiasaina hampitahana ny angon-drakitra eo amin'ny vondrona fitsaboana sy ny vondrona fanaraha-maso ratsy ny fitsapana Dunnett.
Nohadihadiana tamin'ny alalan'ny fitsapana Dunnett ny angon-drakitra LOEC sy NOEC. Natao tamin'ny alalan'ny rindrambaiko Statistica 8.0 (StatSoft) ny fitsapana statistika miaraka amin'ny ambaratonga manan-danja 95% (p < 0.05).
Fotoana fandefasana: 13 Martsa 2025



