inquirybg

Ny Phosphorylation dia manetsika ny mpandrindra ny fitomboan'ny master DELLA, mampiroborobo ny histone H2A mifamatotra amin'ny chromatin ao amin'ny Arabidopsis.

Ny proteinina DELLA dia voatahirympandrindra fitomboanaizay mitana anjara toerana lehibe amin'ny fivoaran'ny zavamaniry ho setrin'ny famantarana anatiny sy ivelany. Amin'ny maha-mpandrindra ny transcriptional azy, ny DELLA dia mifatotra amin'ny transcription factor (TFs) sy histone H2A amin'ny alàlan'ny sehatra GRAS ary alaina hiasa amin'ny mpanentana. Ny fandinihana vao haingana dia naneho fa ny fahamarinan-toeran'ny DELLA dia fehezin'ny rafitra roa aorian'ny fandikana: polyubiquitination ateraky ny hormonina zavamaniry.giberellin, izay mitarika ho amin'ny fahapotehan'izy ireo haingana, ary ny conjugation miaraka amin'ny modifier kely ubiquitin-like (SUMO), izay mampitombo ny fanangonan-dry zareo. Ankoatr'izay, ny hetsika DELLA dia fehezin'ny mekanika glycosylation roa miavaka: O-fucosylation dia manatsara ny fifandraisan'ny DELLA-TF, fa ny fanovana N-acetylglucosamine (O-GlcNAc) mifandray amin'ny O dia manakana ny fifandraisana DELLA-TF. Na izany aza, ny anjara asan'ny DELLA phosphorylation dia tsy mazava satria ny fanadihadiana teo aloha dia naneho valiny mifanohitra, ary ny sasany dia manoro hevitra fa ny phosphorylation dia mampiroborobo na manindry ny fahapotehan'ny DELLA ary ny hafa milaza fa ny phosphorylation dia tsy misy fiantraikany amin'ny fahamarinany. Eto isika dia mamaritra ny tranokalan'ny phosphorylation ao amin'ny GA1-3 repressor (RGA), AtDELLA, nodiovina avy amin'ny Arabidopsis thaliana amin'ny alàlan'ny spectrometry faobe ary mampiseho fa ny phosphorylation ny peptides RGA roa ao amin'ny faritra PolyS sy PolyS / T dia manatsara ny asan'ny RGA amin'ny fampiroboroboana ny fifandraisana H2A sy ny RGA miaraka amin'ny mpanentana kendrena. Marihina fa ny phosphorylation dia tsy nisy fiantraikany tamin'ny fifandraisan'ny RGA-TF na ny fahamarinan'ny RGA. Ny fandinihantsika dia manambara mekanika molekiola izay mahatonga ny phosphorylation amin'ny hetsika DELLA.
Ny famakafakana spectrometric faobe dia nanambara fa ny Pep1 sy ny Pep2 dia tena phosphorylated ao amin'ny RGA ao amin'ny GA1 tsy ampy. Ho fanampin'ity fandalinana ity, ny fandalinana phosphoproteomic dia nanambara ihany koa ny phosphorylation Pep1 ao amin'ny RGA, na dia mbola tsy nianatra aza ny anjara asany53,54,55. Mifanohitra amin'izany kosa, ny phosphorylation Pep2 dia tsy mbola nofaritana teo aloha satria io peptide io dia tsy hita afa-tsy amin'ny fampiasana ny transgene RGAGKG. Na dia ny mutation m1A, izay nanafoana ny phosphorylation Pep1, dia nampihena kely ny asan'ny RGA tao amin'ny planta, dia nisy fiantraikany fanampiny izany rehefa nampiarahina tamin'ny m2A amin'ny fampihenana ny hetsika RGA (sary fanampiny 6). Ny tena zava-dehibe, ny phosphorylation Pep1 dia nihena be tao amin'ny mutant sly1 nampitomboina GA raha oharina amin'ny ga1, nanoro hevitra fa ny GA dia mampiroborobo ny dephosphorylation RGA, mampihena ny asany. Ny mekanika izay manafoana ny phosphorylation RGA dia mitaky fanadihadiana fanampiny. Ny azo atao dia ny fanatanterahana izany amin'ny alàlan'ny fifehezana ny kinase proteinina tsy fantatra. Na dia nasehon'ny fanadihadiana aza fa ny fanehoana ny proteinina CK1 kinase EL1 dia ahena ny GA amin'ny rice41, ny valiny dia manondro fa ny fiovan'ny filaharana ambony kokoa amin'ny Arabidopsis EL1 homologue (AEL1-4) dia tsy mampihena ny phosphorylation RGA. Mifanaraka amin'ny valiny, ny fandalinana phosphoproteomic vao haingana tamin'ny fampiasana andalana Arabidopsis AEL overexpressing ary ny mutant triple ael dia tsy nahalala ny proteinina DELLA ho substrate amin'ireo kinase56 ireo. Rehefa nanomana ny sora-tanana izahay, dia voalaza fa ny GSK3, ny fototarazon'ny GSK3 / SHAGY-toy ny kinase amin'ny varimbazaha (Triticum aestivum), dia afaka phosphorylate DELLA (Rht-B1b) 57, na dia tsy voamarina ao amin'ny planta aza ny phosphorylation ny Rht-B1b amin'ny GSK3. Ny fanehoan-kevitry ny enzymatic in vitro eo anatrehan'ny GSK3 arahin'ny famakafakana spectrometry faobe dia nanambara tranokala phosphorylation telo eo anelanelan'ny sehatra DELLA sy GRAS an'ny Rht-B1b (sary fanampiny 3). Serine amin'ny fanoloana alanine amin'ny tranokala phosphorylation telo dia nahatonga ny fihenan'ny hetsika Rht-B1b amin'ny varimbazaha transgenika, mifanaraka amin'ny fikarohanay fa ny fanoloana alanine ao amin'ny Pep2 RGA dia nampihena ny asan'ny RGA. Na izany aza, ny fanimbana proteinina in vitro dia nanaporofo bebe kokoa fa ny phosphorylation dia afaka manamafy ny Rht-B1b57 ihany koa. Mifanohitra amin'ny vokatra azonay mampiseho fa ny fanoloana alanine ao amin'ny Pep2 RGA dia tsy manova ny fahamarinany amin'ny planta. Ny GSK3 amin'ny varimbazaha dia ortholog of brassinosteroid-insensitive protein 2 (BIN2) ao amin'ny Arabidopsis 57. BIN2 dia mpandrindra ratsy ny BR signaling, ary BR dia manetsika ny lalan'ny famantarana amin'ny alàlan'ny fanimbana ny BIN2 58. Nasehonay fa ny fitsaboana BR dia tsy mampihena ny fahamarinan'ny RGA 59 na ny haavon'ny phosphorylation amin'ny Arabidopsis tsy mitovy amin'ny RGA (tsy mitovy amin'ny RGA) phosphorylated amin'ny BIN2.
Ny angon-drakitra rehetra dia nodinihina ara-statistika tamin'ny fampiasana Excel, ary ny fahasamihafana lehibe dia voafaritra tamin'ny fampiasana t-test an'ny mpianatra. Tsy nisy fomba statistika nampiasaina hamaritana mialoha ny haben'ny santionany. Tsy nisy angon-drakitra nesorina tamin'ny fanadihadiana; tsy natao kisendrasendra ny fanandramana; ary fantatry ny mpikaroka ny fizarana nandritra ny fanandramana sy ny fanombanana ny vokatra. Ny haben'ny santionany dia omena ao amin'ny angano tarehimarika sy ao amin'ny rakitra data manta.

 

Fotoana fandefasana: Apr-15-2025