Voatahiry ny proteinina DELLAmpandrindra ny fitomboanaizay mitana anjara toerana lehibe amin'ny fivoaran'ny zavamaniry ho setrin'ny famantarana anatiny sy ivelany. Amin'ny maha-mpandrindra ny fandikana azy, ny DELLA dia mifamatotra amin'ny singa fandikana (TF) sy ny histone H2A amin'ny alàlan'ny sehatra GRAS ary voaray hiasa amin'ny mpandrindra. Ny fanadihadiana vao haingana dia naneho fa ny fahamarinan'ny DELLA dia fehezin'ny rafitra roa aorian'ny fandikana: ny polyubiquitination ateraky ny hormonina zavamanirygiberelina, izay mitarika ho amin'ny fahasimbana haingana azy ireo, ary ny fifamatorana amin'ny modifier kely ubiquitin-like (SUMO), izay mampitombo ny fanangonany. Ankoatra izany, ny asan'ny DELLA dia fehezin'ny mekanisma glycosylation roa miavaka: Ny O-fucosylation dia manatsara ny fifandraisan'ny DELLA-TF, raha toa kosa ny fanovana ny O-linked N-acetylglucosamine (O-GlcNAc) dia manakana ny fifandraisan'ny DELLA-TF. Na izany aza, tsy mazava ny anjara asan'ny phosphorylation DELLA satria ny fanadihadiana teo aloha dia naneho valiny mifanohitra, miaraka amin'ny sasany milaza fa ny phosphorylation dia mampiroborobo na manakana ny fahasimban'ny DELLA ary ny hafa milaza fa ny phosphorylation dia tsy misy fiantraikany amin'ny fahamarinan'izy ireo. Eto izahay dia mamantatra ireo toerana phosphorylation ao amin'ny GA1-3 repressor (RGA), AtDELLA, nodiovina avy amin'ny Arabidopsis thaliana tamin'ny alàlan'ny spectrometry mass ary mampiseho fa ny phosphorylation an'ny peptide RGA roa ao amin'ny faritra PolyS sy PolyS/T dia mampitombo ny asan'ny RGA amin'ny alàlan'ny fampiroboroboana ny fifamatorana H2A sy ny fifandraisan'ny RGA amin'ny mpandrindra kendrena. Tsara homarihina fa ny phosphorylation dia tsy nisy fiantraikany tamin'ny fifandraisan'ny RGA-TF na ny fahamarinan'ny RGA. Ny fanadihadianay dia mampiseho mekanisma molekiola izay ahafahan'ny phosphorylation miteraka ny asan'ny DELLA.
Nasehon'ny fanadihadiana spectrometric mass nataonay fa samy niha-phosphorylated be tao amin'ny RGA ny Pep1 sy ny Pep2 tao amin'ny fototry ny Ga1 tsy ampy GA. Ho fanampin'ity fanadihadiana ity, ny fanadihadiana phosphoproteomic dia naneho ihany koa ny phosphorylation Pep1 ao amin'ny RGA, na dia mbola tsy nodinihina aza ny anjara asany53,54,55. Mifanohitra amin'izany kosa, tsy mbola voalaza teo aloha ny phosphorylation Pep2 satria ity peptide ity dia azo hita amin'ny alàlan'ny transgene RGAGKG ihany. Na dia nampihena kely fotsiny ny asan'ny RGA tao amin'ny zavamaniry aza ny fiovan'ny m1A, izay nanafoana ny phosphorylation Pep1, dia nanana fiantraikany fanampiny izany rehefa ampiarahina amin'ny m2A amin'ny fampihenana ny asan'ny RGA (Sary Fanampiny 6). Zava-dehibe ny manamarika fa nihena be ny phosphorylation Pep1 tao amin'ny mutant sly1 nohatsaraina GA raha oharina amin'ny ga1, izay manondro fa ny GA dia mampiroborobo ny dephosphorylation RGA, mampihena ny asany. Ny fomba fiasan'ny GA amin'ny fampihenana ny phosphorylation RGA dia mitaky fanadihadiana bebe kokoa. Ny mety ho izy dia ny hoe tratrarina amin'ny alàlan'ny fanaraha-maso ny protein kinase tsy fantatra izany. Na dia nasehon'ny fanadihadiana aza fa ny fanehoana ny proteinina kinase CK1 EL1 dia mihena noho ny GA ao amin'ny vary41, ny valin'ny fikarohanay dia manondro fa ny fiovan'ny ambaratonga ambony kokoa amin'ny homologue Arabidopsis EL1 (AEL1-4) dia tsy mampihena ny phosphorylation RGA. Mifanaraka amin'ny valin'ny fikarohanay, ny fanadihadiana phosphoproteomic vao haingana izay nampiasa ny Arabidopsis AEL overexpressing lines sy ny ael triple mutant dia tsy namantatra proteinina DELLA ho substrates an'ireo kinases56. Rehefa nanomana ny sora-tanana izahay, dia voalaza fa ny GSK3, ny gène izay mandika ny GSK3/SHAGGY-like kinase ao amin'ny varimbazaha (Triticum aestivum), dia afaka mampiroborobo ny DELLA (Rht-B1b)57, na dia tsy voamarina aza ny phosphorylation an'ny Rht-B1b nataon'ny GSK3 tao amin'ny planta. Ny fihetsika enzymatic in vitro teo anatrehan'ny GSK3 narahin'ny fanadihadiana spectrometry mass dia naneho toerana phosphorylation telo hita eo anelanelan'ny sehatra DELLA sy GRAS an'ny Rht-B1b (Sary Fanampiny 3). Ny fanoloana serine ho alanine amin'ireo toerana phosphorylation telo ireo dia nahatonga ny fihenan'ny asan'ny Rht-B1b tao amin'ny varimbazaha transgenic, mifanaraka amin'ny zavatra hitanay fa ny fanoloana alanine ao amin'ny Pep2 RGA dia nampihena ny asan'ny RGA. Na izany aza, ny fanadihadiana momba ny fahasimban'ny proteinina in vitro dia naneho bebe kokoa fa ny phosphorylation dia afaka manamafy orina ny Rht-B1b57 ihany koa. Mifanohitra amin'ny valin'ny fikarohanay izany izay mampiseho fa ny fanoloana alanine ao amin'ny Pep2 RGA dia tsy manova ny fahamarinany ao amin'ny planta. Ny GSK3 ao amin'ny varimbazaha dia ortholog an'ny brassinosteroid-insensitive protein 2 (BIN2) ao amin'ny Arabidopsis 57. Ny BIN2 dia mpandrindra ratsy ny famantarana BR, ary ny BR dia mampihetsika ny lalan'ny famantarana amin'ny alàlan'ny fanimbana BIN2 58. Nasehonay fa ny fitsaboana BR dia tsy mampihena ny fahamarinan'ny RGA 59 na ny haavon'ny phosphorylation ao amin'ny Arabidopsis (Sary Fanampiny 2), izay manondro fa ny RGA dia tsy azo inoana fa ho phosphorylated amin'ny BIN2.
Nohadihadiana ara-statistika tamin'ny fampiasana Excel ny angon-drakitra rehetra, ary voafaritra tamin'ny fampiasana ny fitsapana-t an'ny Student ny fahasamihafana manan-danja. Tsy nisy fomba statistika nampiasaina hamaritana mialoha ny haben'ny santionany. Tsy nisy angon-drakitra nesorina tamin'ny fanadihadiana; tsy kisendrasendra ny fanandramana; ary fantatr'ireo mpikaroka ny fizarana nandritra ny fanandramana sy ny fanombanana ny vokatra. Ny haben'ny santionany dia omena ao amin'ny fanazavana amin'ny sary sy ao amin'ny rakitra angon-drakitra manta.
Fotoana fandefasana: 15 Aprily 2025