Ity fanadihadiana ity dia mampiseho fa ny holatra *Kosakonia oryziphila* NP19 miara-miasa amin'ny rhizosphere izay nalaina avy amin'ny fakany vary dia fanafody famonoana bibikely biolojika mampiroborobo ny fitomboan'ny zavamaniry sy fanafody famonoana bibikely biolojika ho an'ny fanaraha-maso ny fipoahan'ny vary vokatry ny *Pyricularia oryzae*. Natao tamin'ny ravina vaovao amin'ny zana-bary jasmine amin'ny karazana Khao Dawk Mali 105 (KDML105) ny andrana in vitro. Ny valiny dia naneho fa ny NP19 dia nanakana tsara ny fitsimohan'ny conidia *Pyricularia oryzae*. Ny aretina *Pyricularia oryzae* dia voasakana tamin'ny fepetra fitsaboana telo samihafa: voalohany, ny vary dia novolena tamin'ny NP19 ary notsindronina tamin'ny conidia *Pyricularia oryzae*; faharoa, ny fifangaroan'ny conidia NP19 sy *Pyricularia oryzae* dia nampiharina tamin'ny ravina;
Ny bakteria rhizosphere *Kosakonia oryziphila* NP1914dia nalaina avy amin'ny fakam-bary (*Oryza sativa* L. cv. RD6). Ny *Kosakonia oryziphila* NP19 dia manana toetra mampiroborobo ny fitomboan'ny zavamaniry, anisan'izany ny fametrahana azota, ny famokarana asidra indoleacetic (IAA), ary ny famongorana phosphate. Mahaliana fa ny *Kosakonia oryziphila* NP19 dia mamokatra chitinase.14.Ny fampiharana ny voan'ny vary *Kosakonia oryziphila* NP19 amin'ny voan'ny vary KDML105 dia nanatsara ny fahaveloman'ny vary taorian'ny fihanaky ny valan'aretina vary. Ny tanjon'ity fanadihadiana ity dia ny (i) hanazava ny fomba fiasan'ny *Kosakonia oryziphila* NP19 amin'ny fihanaky ny valan'aretina vary ary (ii) handinika ny fiantraikan'ny *Kosakonia oryziphila* NP19 amin'ny fanaraha-maso ny fihanaky ny valan'aretina vary.
Mitana anjara toerana lehibe amin'ny fitomboan'ny zavamaniry sy ny fivoarany ny otrikaina, izay miasa ho toy ny singa mifehy ny aretina mikraoba isan-karazany. Ny otrikaina mineraly ao amin'ny zavamaniry dia mamaritra ny fanoherany ny aretina, ny toetran'ny morphologie na ny sela, ary ny heriny, na ny fahafahany miaina amin'ny aretina. Ny phosphore dia afaka mampihena ny fivoarany ary mampihena ny hamafin'ny fipoahan'ny vary amin'ny alàlan'ny fampitomboana ny famokarana akora fenolika. Amin'ny ankapobeny, ny potassium dia mampihena ny fisian'ny aretina vary maro, toy ny fipoahan'ny vary, ny teboka ravina bakteria, ny teboka fonony ravina, ny lo amin'ny tahony, ary ny teboka ravina. Ny fanadihadiana nataon'i Perrenoud dia naneho fa ny zezika potassium be dia afaka mampihena ny fisian'ny aretina holatra amin'ny vary ary mampitombo ny vokatra. Fikarohana maro no naneho fa ny zezika solifara dia afaka manatsara ny fanoheran'ny voly amin'ny aretina holatra.27Ny magnesium be loatra (singa iray ao amin'ny klorofila) dia mety hiteraka fipoahan'ny vary.21Afaka mamono mivantana ireo mikraoba ny zinc, ka mampihena ny hamafin'ny aretina.22Nasehon'ny andrana natao tany an-tsaha fa na dia avo kokoa noho ny tamin'ny andrana tany anaty vilany aza ny fifantohanan'ny phosphore, potassium, solifara ary zinc tao amin'ny tany an-tsaha, dia mbola niparitaka tamin'ny ravin'ny vary ihany ny fipoahan'ny vary. Mety tsy dia mahomby loatra amin'ny fifehezana ny fipoahan'ny vary ny otrikaina ao anaty tany, satria tsy mety amin'ny fihanaky ny otrikaretina mahery vaika ny hamandoana sy ny mari-pana.
Tao anatin'ny andrana teny an-tsaha, dia hita tamin'ny fitsaboana rehetra ny Stenotrophomonas maltophilia, P. dispersa, Xanthomonas sacchari, Burkholderia multivorans, Burkholderia diffusa, Burkholderia vietnamiensis ary C. gleum. Ny Stenotrophomonas maltophilia dia nalaina avy amin'ny rhizosfera varimbazaha, oats, kôkômbra, katsaka ary ovy ary naneho fanaraha-maso biolojika.asamanohitra ny Colletotrichum nymphaeae.28 Ankoatra izany, ny P. dispersa dia voalaza fa mahomby amin'ny mainty hoditralovomanga.29 Ankoatra izany, ny karazana R1 an'ny Xanthomonas sacchari dia naneho hetsika manohitra ny fipoahan'ny vary sy ny lo amin'ny panicle vokatry ny Burkholderiaglumae.30Afaka mifandray amin'ny sela vary ny Burkholderia oryzae NP19 mandritra ny fitsimohany ary lasa holatra simbiotika endemika ho an'ny karazana vary sasany. Raha toa ka afaka mamboly vary ny bakteria hafa amin'ny tany aorian'ny famindrana, ny holatra mipoitra NP19, rehefa mamboly, dia misy fiantraikany amin'ny anton-javatra maro amin'ny fiarovana ny vary amin'ity aretina ity. Tsy vitan'ny hoe manakana ny fitomboan'ny P. oryzae mihoatra ny 50% ny NP19 (jereo ny Tabilao Fanampiny S1 ao amin'ny appendix an-tserasera), fa mampihena ihany koa ny isan'ny fery mipoitra amin'ny ravina ary mampitombo ny vokatra azo avy amin'ny vary voatsindrona na voakoloina NP19 (RBf, RFf-B, ary RBFf-B) amin'ny fitsapana eny an-tsaha (Sary S3).
Ny holatra Pyricularia oryzae, izay miteraka fipoahan'ny zavamaniry, dia holatra hemittrophic izay mila otrikaina avy amin'ny zavamaniry mpampiantrano mandritra ny aretina. Mamokatra karazana oksizenina mihetsika (ROS) ny zavamaniry mba hampihenana ny aretina avy amin'ny holatra; na izany aza, ny Pyricularia oryzae dia mampiasa paikady isan-karazany mba hanoherana ny ROS vokarin'ny zavamaniry mpampiantrano.31Toa mitana anjara toerana amin'ny fanoheran'ny otrikaretina ny peroksidase, anisan'izany ny fifandraisan'ny proteinina amin'ny rindrin'ny sela, ny fanamafisana ny rindrin'ny xylem, ny famokarana ROS, ary ny fanafoanana ny peroxyde hydrogène.32Mety ho rafitra manokana manala ROS ny anzima antioxidant. Amin'ny alàlan'ny toetrany antioxidant, ny superoxide dismutase (SOD) sy ny peroxidase (POD) dia manampy amin'ny fanombohana ny valin'ny fiarovana, miaraka amin'ny SOD izay miasa ho fiarovana voalohany.33Ao amin'ny vary, mitombo ny asan'ny peroxidase avy amin'ny zavamaniry rehefa voan'ny aretina toy ny *Pyricularia oryzae* sy *Xanthomonas oryzae pv. Oryzae*.32Ato amin'ity fandalinana ity, nitombo ny asan'ny peroxidase tamin'ny vary novolena sy/na notsindronina tamin'ny *Magnaporthe oryzae* NP19; na izany aza, tsy nisy fiantraikany tamin'ny asan'ny peroxidase ny *Magnaporthe oryzae*. Ny Superoxide dismutase (SOD), amin'ny maha-H₂O₂ synthase azy, dia mampiroborobo ny fampihenana ny O₂⁻ ho H₂O₂. Ny SOD dia mitana anjara toerana lehibe amin'ny fanoheran'ny zavamaniry ny fihenjanana isan-karazany amin'ny alàlan'ny fandanjalanjana ny fifantohana H₂O₂ ao anatin'ny zavamaniry, ka mampitombo ny fandeferan'ny zavamaniry amin'ny fihenjanana isan-karazany³⁴. Ato amin'ity fandalinana ity, tao amin'ny andrana vilany, 30 andro taorian'ny tsindrona *Magnaporthe oryzae* (30 DAT), ny asan'ny SOD tao amin'ny vondrona RF sy RBF dia 121.9% sy 104.5% ambony noho ny tao amin'ny vondrona R, tsirairay avy, izay manondro ny valintenin'ny SOD tamin'ny aretina *Magnaporthe oryzae*. Na tamin'ny andrana natao tany anaty vilany na tany an-tsaha, ny asan'ny SOD tao amin'ny vary nasiana *Magnaporthe oryzae* NP19 dia 67.7% sy 28.8% ambony noho ny tao amin'ny vary tsy nasiana 30 andro taorian'ny tsindrona. Ny tontolo iainana, ny loharanon'ny adin-tsaina, ary ny karazana zavamaniry³⁵ dia voakasiky ny fihetsiky ny zavamaniry amin'ny biochemika. Ny asan'ny anzima antioxidant an'ny zavamaniry dia voakasiky mivantana avy amin'ny anton-javatra ara-tontolo iainana, izay misy fiantraikany amin'ny asan'ny anzima antioxidant an'ny zavamaniry amin'ny alàlan'ny fanovana ny vondrom-piarahamonina mikraoba ao amin'ny zavamaniry.
Ny holatra voan'ny aretin'ny vary (Kosakonia oryziphila NP19, laharana fidirana NCBI PP861312) nampiasaina tamin'ity fandalinana ity dia karazana13nalaina avy amin'ny fakany vary RD6 tao amin'ny faritanin'i Nakhon Phanom, Tailandy (16° 59′ 42.9″ N 104° 22′ 17.9″ E). Ity karazana vary ity dia novolena tao anaty ron-tsakafo (NB) tamin'ny 30°C sy 150 rpm nandritra ny 18 ora. Mba hikajiana ny fifantohan'ny bakteria, dia norefesina ny fidiran'ny bakteria amin'ny 600 nm. Ny fifantohan'ny bakteria dia namboarina ho10⁶CFU/mL miaraka amin'ny rano deionized sterile (dH₂O). Ny holatra vary (Pyricularia oryzae) dia natsofoka tamin'ny toerana iray tao amin'ny agar dextrose ovy (PDA) ary notehirizina tamin'ny 25°C nandritra ny 7 andro. Ny mycelium fungal dia nafindra tao anaty medium agar bran rice (2% (w/v) bran rice, 0.5% (w/v) sucrose, ary 2% (w/v) agar levona ao anaty rano deionized, pH 7) ary notehirizina tamin'ny 25°C nandritra ny 7 andro. Ravina vary mora voan'ny aretina (KDML105) efa nodiovina no napetraka teo amin'ny mycelium mba hiteraka conidia ary notehirizina tamin'ny 25°C nandritra ny 5 andro teo ambanin'ny hazavana UV sy fotsy mitambatra. Nangonina ny conidia tamin'ny alalan'ny famafana moramora ny mycelium sy ny velaran'ny ravina voan'ny aretina tamin'ny vahaolana Tween 20 0.025% (v/v) efa nodiovina 10 ml. Ny vahaolana fungal dia nosivana tamin'ny alalan'ny lamba cheesecloth valo sosona mba hanesorana ny mycelium, agar, ary ny ravin'ny vary. Nohavaozina ho 5 × 10⁵ konidia/ml ny fifantohan'ny konidia tao anatin'ny fampiatoana mba hanaovana fanadihadiana fanampiny.
Nomanina tamin'ny alalan'ny fambolena tao anaty ranoka NB tamin'ny 37 °C nandritra ny 24 ora ny kolontsaina vaovaon'ny sela Kosakonia oryziphila NP19. Taorian'ny centrifugation (3047 × g, 10 min), dia nangonina ny pellet sela, nosasana indroa tamin'ny saline phosphate-buffered 10 mM (PBS, pH 7.2), ary naverina natsipy tao amin'io buffer io ihany. Norefesina tamin'ny 600 nm ny hakitroky ny optika amin'ny fampiatoana sela, ka nahazoana sanda eo amin'ny 1.0 eo ho eo (mitovy amin'ny 1.0 × 10⁷ CFU/μl voafaritra amin'ny alalan'ny fametrahana takelaka amin'ny takelaka agar-tsakafo). Nahazoana conidia an'ny P. oryzae tamin'ny alalan'ny fampiatoana azy ireo tao anaty vahaolana PBS ary fanisana azy ireo tamin'ny fampiasana hemocytometer. Ny fampiatoana ny *K. oryziphila* NP19 sy *P. Ho an'ny andrana famafana ravina, dia nomanina tamin'ny ravin-bary vaovao ny conidia K. oryziphila* tamin'ny fifantohana 1.0 × 10⁷ CFU/μL sy 5.0 × 10² conidia/μL. Toy izao ny fomba fanomanana santionan'ny vary: notapahina ny ravina 5 sm ny halavan'ny zana-bary ary napetraka tao anaty lovia Petri nasiana taratasy mando. Noforonina ny vondrona fitsaboana dimy: (i) R: ravin-bary tsy nasiana bakteria ho fanaraha-maso, nasiana vahaolana Tween 20 0.025% (v/v); (ii) RB + F: vary nasiana K. oryziphila NP19, nasiana 2 μL amin'ny fampiatoana conidia avy amin'ny holatra miteraka fipoahan'ny vary; (iii) R + BF: Vary ao amin'ny vondrona R nasiana 4 μl amin'ny fangaroan'ny fampiatoana conidia holatra mipoitra sy K. oryziphila NP19 (tahan'ny volume 1:1); (iv) R + F: Vary ao amin'ny vondrona R nasiana fampiatoana konidia holatra mipoitra 2 μl; (v) RF + B: Vary ao amin'ny vondrona R nasiana fampiatoana konidia holatra mipoitra 2 μl no notehirizina nandritra ny 30 ora, ary avy eo dia nampiana K. oryziphila NP19 2 μl tao amin'io toerana io ihany. Notehirizina tamin'ny 25°C tao anaty haizina nandritra ny 30 ora ny lovia Petri rehetra ary avy eo napetraka teo ambany hazavana mitohy. Noforonina intelo ny vondrona tsirairay. Rehefa afaka 72 ora nikoloana, dia nojerena sy nohadihadiana tamin'ny alalan'ny mikroskopia elektronika scanning (SEM) ny sela zavamaniry. Raha fintinina, dia naraikitra tao anaty buffer phosphate misy glutaraldehyde 2.5% (v/v) ny sela zavamaniry ary nohamainina tamin'ny alalan'ny vahaolana etanol maromaro. Rehefa avy nohamainina tamin'ny gazy karbonika tamin'ny teboka manan-danja, dia norakofana volamena ireo santionany ary nojerena tamin'ny alalan'ny mikroskopia elektronika scanning.15
Fotoana fandefasana: 15 Desambra 2025