Akora avy amin'ny zavamaniry sy ny otrikaretina
Nanome sarintany momba ny fikambanan'ny sorghum fantatra amin'ny anarana hoe mponina miovaovan'ny sorghum (SCP) ny Dr. Pat Brown tao amin'ny Oniversiten'i Illinois (ankehitriny ao amin'ny UC Davis). Efa voalaza teo aloha izany ary fitambarana taranaka samihafa niova ho tsy mahatsapa ny foto-potoana ary kely kokoa ny habeny mba hanamorana ny fitomboana sy ny fivoaran'ny zavamaniry any amin'ny tontolo iainana amerikana. 510 ny taranaka avy amin'ity mponina ity no nampiasaina tamin'ity fandalinana ity na dia noho ny tsy fitsimohany ratsy sy ny olana hafa momba ny fanaraha-maso ny kalitao aza, dia tsy ny taranaka rehetra no nampiasaina tamin'ny famakafakana ireo toetra telo ireo. Farany, ny angon-drakitra avy amin'ny taranaka 345 no nampiasaina ho an'ny famakafakana ny valin'ny chitin, 472 ny taranaka ho an'ny valin'ny flg22, ary 456 ho an'ny fanoherana ny TLS.B. cookeiNy karazana LSLP18 dia azo avy amin'ny Dr. Burt Bluhm ao amin'ny Oniversiten'i Arkansas.
Fandrefesana ny valintenin'ny MAMP
MAMP roa samihafa no nampiasaina tamin'ity fandalinana ity flg22, (Genscript catalog# RP19986), ary chitin. Ny zavamaniry sorghum dia nambolena tao anaty vilany napetraka teo amin'ny fisaka feno tany (33% Sunshine Redi-Earth Pro Growing Mix) tao amin'ny trano fonenana. Notondrahana rano ny zavamaniry ny andro talohan'ny fanangonana santionany mba hisorohana ny hamandoana be loatra amin'ny ravina amin'ny andro fanangonana.
Nozaraina kisendrasendra ireo taranaka ary, noho ny antony ara-pitaovana, dia nambolena tamin'ny andiany misy taranaka 60. Ho an'ny taranaka tsirairay, dia nambolena "vilany" telo misy voa roa isaky ny andiany. Nambolena ireo andiany manaraka raha vao vita ny fanodinana ny andiany teo aloha mandra-panombanana ny mponina manontolo. Nisy fanandramana roa natao ho an'ny MAMP roa miaraka amin'ny génotypes naverina nozaraina kisendrasendra tamin'ny andiany roa tsirairay.
Natao araka ny voalaza teo aloha ny fanadihadiana ROS. Raha fintinina, ho an'ny andiany tsirairay, voa enina no nambolena tao anaty vilany 3 samihafa. Avy amin'ireo zana-kazo vokarina, telo no nofantenana mifototra amin'ny fitoviana. Tsy nampiasaina ireo zana-kazo izay toa tsy mahazatra na lava kokoa na fohy kokoa noho ny ankamaroany. Nesorina tamin'ny ampahany mivelatra indrindra amin'ny ravina faha-4 amin'ny zavamaniry sorghum telo samihafa 15 andro ny kapila ravina efatra misy savaivony 3 mm. Kapila iray isaky ny ravina avy amin'ny zavamaniry roa ary kapila roa avy amin'ny zavamaniry iray, ary ny kapila faharoa no ho fanaraha-maso ny rano (jereo eto ambany). Natsingevana tsirairay teo ambonin'ny H20 50 µl tao anaty takelaka mainty misy lavaka 96 ireo kapila, nofehezina tamin'ny tombo-kase aluminium mba tsy ho tratran'ny hazavana, ary notehirizina tamin'ny mari-pana ao an-trano nandritra ny alina. Ny ampitso maraina dia natao ny vahaolana fanehoan-kevitra tamin'ny fampiasana probe chemiluminescent 2 mg/ml L-012 (Wako, katalaogy # 120-04891), peroxidase horseradish 2 mg/ml (Type VI-A, Sigma-Aldrich, katalaogy # P6782), ary Chitin 100 mg/ml na Flg22 2 μM. Nampiana 50 µl tamin'ity vahaolana fanehoan-kevitra ity tao anaty lavaka telo tamin'ireo efatra. Ny lavaka fahefatra dia fanaraha-maso mock, izay nampiana ny vahaolana fanehoan-kevitra tsy misy ny MAMP. Nampidirina tao anaty takelaka tsirairay ihany koa ny lavaka banga efatra izay misy rano ihany.
Rehefa avy nampiana ny vahaolana momba ny fihetsehana, dia norefesina tamin'ny fampiasana ny SynergyTM 2 multi-detection microplate reader (BioTek) isaky ny 2 minitra mandritra ny 1 ora ny luminescence. Maka fandrefesana luminescence isaky ny 2 minitra mandritra io 1 ora io ny mpamaky takelaka. Nokajiana ny fitambaran'ny famakiana 31 rehetra mba hanomezana ny sanda ho an'ny lavaka tsirairay. Ny sanda tombanana ho an'ny valinteny MAMP ho an'ny genotype tsirairay dia nokajiana ho (salan'isan'ny luminescence an'ny lavaka fanandramana telo—ny sandan'ny lavaka mock) -minus ny sandan'ny lavaka banga salan'isa. Ny sandan'ny lavaka banga dia akaiky ny aotra hatrany.
Kapila ravin'nyNicotiana benthamiana, karazana sorgoma iray mandray tsara ny vokatra (SC0003), ary karazana sorgoma iray mandray tsara ny vokatra (PI 6069) dia nampidirina ho fanaraha-maso tao amin'ny takelaka 96-lavaka tsirairay ho an'ny fanaraha-maso ny kalitao.
B. cookeifanomanana sy fanaovana vaksiny
B. cookeiNomanina araka ny voalaza teo aloha ny vaksiny. Raha fintinina, nalona tao anaty rano nandritra ny telo andro ny voam-bary sorgho, nosasana, nototoina tao anaty tavoara kônika 1L ary notehirizina tao anaty autoclave nandritra ny adiny iray tamin'ny 15psi sy 121 °C. Avy eo dia nototoina tamin'ny mycelium macerated 5 ml avy amin'ny kolontsaina vaovao ny voam-bary.B. cookeiNalaina avy amin'ny LSLP18 ny voany ary navela tao anaty vilany nandritra ny 2 herinandro tamin'ny mari-pana ao an-trano, sady nohozongozonina isaky ny 3 andro ny tavoahangy. Rehefa afaka 2 herinandro, dia nohamainina tamin'ny rivotra ny voam-bary feno holatra ary notehirizina tamin'ny 4 °C mandra-pahatongan'ny tsindrona eny an-tsaha. Nampiasaina nandritra ny fitsapana manontolo io tsindrona io ary nohavaozina isan-taona. Ho an'ny tsindrona, dia napetraka tao anaty vilany misy zavamaniry sorghum 4-5 herinandro ny voam-bary 6–10 feno holatra. Ny spores vokarin'ireo holatra ireo no nanomboka ny aretina tamin'ireo zavamaniry sorghum tanora tao anatin'ny herinandro.
Fiomanana amin'ny voa
Talohan'ny nambolena teny an-tsaha, dia notsaboina tamin'ny fanafody famonoana bibikely, ary fangaro safener ny voan'ny sorghum izay misy ~1% fanafody famonoana bibikely Spirato 480 FS, 4% fanafody famonoana bibikely Sebring 480 FS, 3% fanafody safener Sorpro 940 ES. Avy eo dia nohamainina nandritra ny 3 andro ny voa mba handrakotra manify ny voa. Ny safener dia nahafahana nampiasa ny fanafody famonoana bibikely Dual Magnum ho fitsaboana mialoha ny fipoiran'ny voa.
Fanombanana ny fanoherana ny teboka ravina kendrena
Nambolena tao amin'ny Foibe Fikarohana momba ny voly any Clayton, NC ny SCP tamin'ny 14–15 Jona 2017 sy 20 Jona 2018 tamin'ny alalan'ny famolavolana bloc feno kisendrasendra miaraka amin'ny famerenana fanandramana roa isaky ny tranga. Nambolena tamin'ny andalana tokana 1.8 m miaraka amin'ny sakany andalana 0.9 m ny fanandramana tamin'ny fampiasana voa 10 isaky ny tetika. Nambolena andalana sisin-tany roa manodidina ny sisin'ny fanandramana tsirairay mba hisorohana ny fiantraikan'ny sisiny. Nambolena tamin'ny 20 Jolay 2017 sy 20 Jolay 2018 ny fanandramana, ary tamin'izany fotoana izany dia teo amin'ny dingana fitomboana faha-3 ny zavamaniry sorghum. Noraisina tamin'ny mizana iray ka hatramin'ny sivy ny fanombanana, izay nahazoana isa sivy ny zavamaniry tsy mampiseho famantarana ny aretina ary nahazoana isa iray ny zavamaniry maty tanteraka. Noraisina ny fanombanana roa tamin'ny taona 2017 ary famakiana efatra tamin'ny taona 2018 nanomboka roa herinandro taorian'ny nambolena isan-taona. Nokajiana araka ny voalaza teo aloha ny sAUDPC (faritra manara-penitra eo ambanin'ny fiolahana fivoaran'ny aretina).
Fotoana fandefasana: 01-Apr-2021