Fitaovana zavamaniry sy pathogen
Fikambanan'ny sorghum manao sarintany ny mponina fantatra amin'ny anarana hoe Sorghum Conversion Population (SCP) no nomen'ny Dr. Pat Brown ao amin'ny Oniversiten'i Illinois (ao amin'ny UC Davis ankehitriny).Efa nofaritana teo aloha izy io ary fitambarana tsipika isan-karazany navadika ho photoperiod-insensitivity sy tsanganana kely kokoa mba hanamora ny fitomboana sy ny fivoaran'ny zavamaniry any amin'ny tontolo amerikana.510 andalana avy amin'ity mponina ity no nampiasaina tamin'ity fanadihadiana ity na dia noho ny tsimokaretina ratsy sy olana hafa momba ny fanaraha-maso kalitao, dia tsy ny andalana rehetra no nampiasaina tamin'ny famakafakana ireo toetra telo ireo.Ny angon-drakitra farany avy amin'ny andalana 345 dia nampiasaina ho an'ny famakafakana ny valin'ny chitin, andalana 472 ho an'ny valin'ny flg22, ary 456 ho an'ny fanoherana TLS.B. cookeiNy strain LSLP18 dia azo avy amin'ny Dr. Burt Bluhm ao amin'ny Oniversiten'i Arkansas.
Fandrefesana valiny MAMP
MAMP roa samy hafa no nampiasaina tamin'ity fandalinana ity flg22, (Katalaogy Genscript # RP19986), ary chitin.Ny zava-maniry ampemby dia nambolena tamin'ny sisiny napetraka teo amin'ny tany feno tany (33% Sunshine Redi-Earth Pro Growing Mix) tao amin'ny trano fonenana.Notondrahana rano ny zavamaniry ny andro alohan'ny fanangonana santionany mba hisorohana ny hamandoan'ny ravina fanampiny amin'ny andro fanangonana.
Ny tsipika dia natao kisendrasendra ary, noho ny antony ara-pitaovana, dia nambolena tao anaty andiany 60.Ho an'ny andalana tsirairay, dia nambolena 'vilany' telo misy masomboly roa isaky ny andalana.Ny andiany manaraka dia nambolena raha vantany vao voavoatra ny andiany teo aloha mandra-pitsapana ny mponina iray manontolo.Hazakazaka andrana roa no natao ho an'ny MAMP roa miaraka amin'ny genotype averina kisendrasendra isaky ny hazakazaka roa.
Ny fitiliana ROS dia natao araka ny voalaza teo aloha.Fohy, isaky ny andalana dia voa enina no nambolena tao anaty vilany 3 samihafa.Avy amin'ireo zana-kazo azo dia nofantenana telo mifototra amin'ny fitoviana.Ny zana-kazo izay toa tsy mahazatra na lava be na fohy kokoa noho ny ankamaroany dia tsy nampiasaina.Ravinkazo efatra misy savaivony 3 mm no nesorina tamin'ny ampahany midadasika indrindra amin'ny ravina faha-4 amin'ny zavamaniry ampemby telo samy hafa 15 andro.Kapila iray isaky ny raviny avy amin'ny zava-maniry roa sy kapila roa avy amin'ny zava-maniry iray, ka ny kapila faharoa no lasa fanaraha-maso ny rano (jereo eto ambany).Ny kapila dia natsingevan'ny tsirairay tamin'ny 50 µl H20 tao anaty takelaka mainty 96-lavaka, nofehezina tamin'ny tombo-kase aliminioma mba tsy ho tratran'ny hazavana, ary tazonina amin'ny mari-pana mandritra ny alina.Ny ampitso maraina dia nisy vahaolana fanehoan-kevitra natao tamin'ny fampiasana 2 mg / ml chemiluminescent probe L-012 (Wako, catalog # 120-04891), 2 mg / ml horseradish peroxidase (Type VI-A, Sigma-Aldrich, catalog # P6782), ary 100 mg/ml Chitin na 2 μM an'ny Flg22.50 µl amin'ity vahaolana fanehoan-kevitra ity dia nampiana ny telo tamin'ireo lavadrano efatra.Ny fantsakana fahefatra dia fanaraha-maso maneso, izay nampiana ny vahaolana fanehoan-kevitra tsy misy ny MAMP.Nisy lavaka fantsakana efatra tsy nisy afa-tsy rano ihany koa nampidirina tao anatin’ny takelaka tsirairay.
Taorian'ny nampiana ny vahaolana fanehoan-kevitra, ny famirapiratana dia norefesina tamin'ny fampiasana SynergyTM 2 multi-detection microplate reader (BioTek) isaky ny 2 min mandritra ny 1 ora.Ny mpamaky takelaka dia maka fandrefesana famirapiratana isaky ny 2 min mandritra ity 1 ora ity.Ny fitambaran'ny vakiteny 31 rehetra dia kajy mba hanomezana ny sandan'ny lavadrano tsirairay.Ny sanda tombanana ho an'ny valin'ny MAMP ho an'ny genotype tsirairay dia nokajiana ho (sandan'ny luminescence antonony amin'ireo lavadrano andrana telo - ny sandan'ny lava-drano maneso) - minus ny sandan'ny lava-drano banga.Ny sandan'ny fantsakana banga dia nanakaiky hatrany ny aotra.
Leaf discs nyNicotiana benthamiana, tsipika ampemby mandray andraikitra ambony (SC0003), ary tsipika ampemby mivaingana iray (PI 6069) dia nampidirina ihany koa ho fanaraha-maso isaky ny takelaka 96-lavaka ho an'ny tanjona fanaraha-maso ny kalitao.
B. cookeifanomanana sy ny inoculation
B. cookeiinculum dia nomanina araka ny voalaza teo aloha.Fohy ny voamaina ampemby dia nalona tao anaty rano nandritra ny telo andro, nosasana, nalaina tao anaty tavoahangy kesika 1L ary natao autoclave nandritra ny adiny iray tamin’ny 15psi sy 121°C.Ny voa avy eo dia natsipy tamin'ny 5 ml mycelia macerated avy amin'ny kolontsaina vaovaoB. cookeiMitokana ny LSLP18 ary avelao mandritra ny 2 herinandro amin'ny mari-pana amin'ny efitrano, manozongozona ny tavoara isaky ny 3 andro.Aorian'ny herinandro 2, ny voan'ny ampemby voan'ny holatra dia maina amin'ny rivotra ary avy eo tehirizina amin'ny 4 ° C mandra-pahatongan'ny tsimokaretina.Io inoculum io ihany no nampiasaina nandritra ny fitsapana manontolo ary natao vaovao isan-taona.Ho an'ny inoculation, voamaina 6-10 infected dia napetraka ao anaty whorl amin'ny zavamaniry ampemby 4-5 herinandro.Ny spores vokarina avy amin'ireo holatra ireo dia nitarika aretina tao anatin'ireo zavamaniry ampemby tanora tao anatin'ny herinandro.
Fiomanana voa
Talohan'ny nambolena tao amin'ny saha, ny voan'ny ampemby dia notsaboina tamin'ny fungicide, famonoana bibikely, ary fifangaroana azo antoka izay misy ~ 1% Spirato 480 FS fungicide, 4% Sebring 480 FS fungicide, 3% Sorpro 940 ES mpiaro voa.Avy eo dia maina ny masomboly mandritra ny 3 andro izay nanome loko manify an'io fangaro io manodidina ny voa.Ny mpiaro dia namela ny fampiasana ny herbicide Dual Magnum ho fitsaboana mialoha ny fivoahana.
Fanombanana ny fanoherana ny tadin'ny ravin-kazo
Ny SCP dia nambolena tao amin'ny tobim-pikarohana Central Crops ao Clayton, NC tamin'ny 14-15 Jona 2017 sy ny 20 Jona 2018 tamin'ny famolavolana sakana feno kisendrasendra miaraka amin'ny replication andrana roa isaky ny tranga.Ny andrana dia nambolena tamin'ny andalana tokana 1,8 m miaraka amin'ny sakany andalana 0,9 m amin'ny fampiasana masomboly 10 isaky ny tany.Laharana sisintany roa no nambolena manodidina ny sisin'ny andrana tsirairay mba hisorohana ny voka-dratsin'ny sisiny.Ny andrana dia natao tamin'ny 20 Jolay 2017 sy Jolay 20, 2018 ary tamin'izany fotoana izany dia teo amin'ny dingana fitomboana 3 ny zavamaniry ampemby. ny zavamaniry maty dia isaina ho iray.Naoty roa no noraisina tamin'ny 2017 ary famakiana efatra tamin'ny 2018 nanomboka tapa-bolana taorian'ny inoculation isan-taona.sAUDPC (faritra manara-penitra eo ambanin'ny curve fivoaran'ny aretina) dia kajy araka ny voalaza teo aloha.
Fotoana fandefasana: Apr-01-2021